Kmeňové bunky
Kmeňové bunky :
- sú primárne nediferencované bunky, ktoré majú schopnosť sa premeniť (diferenciácia) na akýkoľvek iný druh buniek. Táto schopnosť umožňuje telu vytvoriť nové bunky a opraviť tak poškodené časti tela, ktoré sa skladá aj z buniek, ktoré sa nevedia deliť.
- Môžu byť embryonálne, germinátne a dospelé
- Sú izolované z ICM (embryoblastu embrya = blastocysta)
- Môžu byť kultivované počas niekoľkých generácií bez diferencovania a bez nárastu karyotypových anomálií
- Ked sú opäť zaradené do preimplantačného embrya, pokračuje ich normálna diferenciácia a zúčastnujú sa normálneho vývoja a funkčnosti zárodočných buniek, súschopné podielať sa na tvorbe všetkých tkanív
- Potencionálnym zdrojom kmeňových buniek môžu byť:
ü Bunkové embryá v štádiu blastocysty
ü Bunkové embryá z pohlavných orgánov
· ESC - embryonálne kmeňové bunky – embryonic stem cells, izolované z vnútra bunkovej masy, bunky embrya blastocysty, plodov v období gravidity, krvi pupočnej šnúry
§ Výhody využitia:
ü Je ich schopnosť byť úspešne izolované a následne požadovaný čas udržané v nediferencovanom stave v podmienkach in vitro
ü Vplyvom špecifických rasrových faktorov vytvoriť špecifické typy buniek pre sledované tkanivo v podmienkach in vitro
ü Kolonizovať embryo a vyvíjať sa v podmienkach in vivo (tvorba chimér)
§ Nevýhody:
ü Nevýhodou je nízka percentuálna úspešnosť integrácie prenášaných génov
ü Narodené jedince sú chrakteristické vysokým stupňom mozaicizmu pre sledovaný gén
· GSC – bunky krvi z pupočnej šnúry, niektorých dospelých orgánov, kostnej drene, semenníkov, koreňov zubov
· ASC – bunky pochádzajúce z rozdielnych zdrojov, nemajú však rovnaké vlastnosti, resp. rovnký vývojový potenciál tkaniva
Izolácia (magnet StemCell) – tie bunky ktoré sú izlované z vnútornej bunkovej masy embrya v štádiu blastocysty sú kvalitou ideálne – pluripotentné. Jedná sa o nediferencované s rozsiahlim dobre viditeľným jadrom. Majú schopnosť kolonizovať hostiteľské embryo.
Manipulácia:
- Súzaložené na manipulácii s včasnými embryami
- Práca je viazaná krátkym časovým intervalom, kedy sú vajíčka a včasné embryá vhodné na manipuláciu v podmienkach in vitro
- Obdobie ovulácie –pôsobením folikulostimulačného a luteinizačného hormónu dochádza k dozrievaniu a k ovulácii oocytu, oocyt sa dostáva z vaječníka do ampuly čo je vhodné obdobie na oplodnenie in vitro a klonovanie
- Obdobie prechodu cez vajcovod – po preniknutí spermie do vajíčka sa začína tvarovať samičie a samčie prvojadro a dochádza k vytvoreniu prvého pólového telieska, splynutím samčieho a samičieho prvojadra vznikne zygota, ktorá sa delí na blastoméry a až do štádia moruly prechádza vyjcovodom. Toto obdobie je vhodné na transgenézu, klonovanie a produkciu chimerických jedincov.
- Obdobie implantácie – v štádiu moruly emrbyo prechádza vajcovodom do maternice a odtial do sliznice maternice. Toto štáium je vhodné na izoláciu embryonálnych kmeňových buniek, tvorbu chimerických jedincov a klonovanie
