Bakteriofág Lambda

 

BAKTERIOFÁG  λ ( LAMBDA )

Je to vírus rozmnožujúci sa v baktériách ( najmä E. coli ).

Vlastnosti:

  • Klonovacia kapacita 23 kb
  • Lineárna 2-vláknová molekula s dĺžkou 47 000 bp
  • Cos miesta ( kohézne konce ) na 5´ konci
  • Genóm:
    •  40% tvoria gény pre syntézu hlavičky a bičíka
    •  40% tvoria gény pre lyzogénny stav fága. Je to tzv. neesenciálna oblasť genómu
    •  20% tvoria gény regulačné, zodpovedné za replikáciu a fága a lýzu bunky

Akákoľvek úprava bakteriofága spôsobuje vznik CHÁRONOV = derivátov λ fágu, keď sa donorová DNA vkladá na miesto génov lyzogénneho cyklu fágu λ:

  • INZERČNÉ VEKTORY, v ktorých sa donorová DNA vkladá do 1 restrikčného miesta na DNA fága λ. Klonovacia kapacita je 13 kb.
  • SUBSTIUČNÉ VEKTORY, u ktorých sa donorová DNA vkladá na miesto stredného úseku fágového vektora. Počiatočné aj konečné miesto úseku ( teda 2 miesta ) a teda aj celý úsek je pred klonovanín vyštiepený pomocou RE. Klonovacia kapacita je 9-23 kb.

Použitie bakteriofága λ ako vektora má niekoľko výhod oproti plazmidovým vektorom:

  • Klonovacia kapacita je až 23 kb, teda je 2x väčšia ako u plazmidov
  • Rekombinantná DNA sa do hostiteľskej bunky môže preniesť prostredníctvom fágových kapsidovv procese fágovej infekcie, ktorej efektivita je rádovo niekoľkokrát vyššia ako efektivita transformácie plazmidovou DNA